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基礎信息Product information
產品名稱:

小鼠神經少突膠質前體細胞

產品簡介:

小鼠神經少突膠質前體細胞公司正在出售的產品:MRGPRX4蛋白抗體 鋅指蛋白677抗體 TUB蛋白抗體 小鼠腎實質細胞 大鼠腦動脈血管內皮細胞 EOMA小鼠血管內皮瘤細胞 人骨肉瘤細胞+LUC;U20S-LUC-PURO

產品型號:

廠商性質:經銷商

訪問量:1460

更新時間:2025-04-09

產品特性Product characteristics

小鼠神經少突膠質前體細胞

小鼠神經少突膠質前體細胞

商品屬性:

組織來源

產品規格

細胞形態

貨號

腦組織

5×105cells/T25細胞培養瓶

雙極、多極形

YS-01X7716

細胞簡介:

小鼠神經少突膠質前體分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。少突膠質細胞分布于中樞神經系統,在銀浸染標本中,少突膠質細胞比星狀膠質細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。少突膠質細胞(oligodendrocyte)是中樞神經系統(CNS)的成髓鞘神經膠質細胞,其發育要經歷少突膠質細胞祖細胞、前少突膠質細胞祖細胞、未成熟和成熟少突膠質細胞等階段。有學者將少突膠質細胞按其發育程度和形態分為三型。但是,細胞發育是一個連續的過程,其形態、表達產物和功能的演變沒有嚴格的界限,因此,其分類是相對的。這三型分別為:Ⅰ型少突膠質細胞又稱前O2Apre-O2A progenitor cell)。細胞呈圓形,表面光滑,直徑約3μm,體外混合培養時成簇生長在星形膠質表面,具有很強的分裂增殖潛力,表達GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion moleculePSA-NCAM)等。Ⅱ型少突膠質細胞胞體常有雙極或三極突起,極少數為單極突起,直徑約7μm,有一定的分裂增殖能力。體外培養時為雙潛能細胞,既可分化為少突膠質細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質,故又稱為少突膠質細胞-Ⅱ型星形膠質祖細胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cellO2A)。O2A除表達GM1和波形蛋白外還表達GD3GQ(淋巴雜交瘤株A2B5產生GQ的抗體),故常用A2B5抗體標記O2A。Ⅲ型少突膠質細胞不再具有分裂增殖能力,為分裂終期細胞。直徑約10μm。根據其形成髓鞘的能力,又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質細胞。不成熟的OL胞體常伸出45條較粗大突起,表面還殘留有A2B5標記物,同時也表達O1-O4抗原,無形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質細胞突起有如蜘蛛網,大量表達半乳糖腦苷脂(galactocerebro sideGC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid proteinPLP)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic proteinMBP)等,有對軸突髓鞘化的能力。體外培養的少突膠質細胞前體細胞(簡稱少突膠質細胞前體細胞)包括前O2AO2A和未成熟少突膠質細胞,前兩者具有增殖能力。

方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠神經少突膠質采用消化、混合細胞營養缺失培養、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

質量檢測:

公司實驗室分離的小鼠神經少突膠質前體經A2B5免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

包被條件 PLL0.1mg/ml

培養基 含B-27 SupplementPDGFbFGFPenicillinStreptomycin

換液頻率 每2天半量換液1

生長特性 貼壁

細胞形態 雙極、多極形

傳代特性 不傳代,不增值,存活1-2

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%CO25%

小鼠神經少突膠質前體細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養法

  組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養法

  ③ 懸浮細胞培養法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

  ④器官培養

  器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。

小鼠神經少突膠質前體細胞


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白介素7(IL7)重組蛋白 Recombinant Interleukin 7 (IL7)

CCL17 Protein Human 重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白

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原代細胞的培養條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養

  1、原代培養時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;

  4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行


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