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基礎信息Product information
產品名稱:

兔腦膜成纖維細胞

產品簡介:

兔腦膜成纖維細胞公司正在出售的產品:泛素蛋白連接酶G2抗體 人膀胱平滑肌細胞 蛛毒素受體2抗體 小鼠臍帶間充質干細胞 轉化相關基因MED11抗體 小鼠肺動脈成纖維細胞 多巴胺受體調節因子DRRF抗體 小鼠肝癌細胞;H22-H8D8

產品型號:

廠商性質:經銷商

訪問量:1077

更新時間:2025-04-09

產品特性Product characteristics

兔腦膜成纖維細胞

兔腦膜成纖維細胞

商品屬性:

組織來源

產品規格

細胞形態

貨號

腦膜

5×105cells/T25細胞培養瓶

成纖維細胞樣

YS-01X8398

細胞簡介:

兔腦膜分離自腦膜組織;腦膜是顱骨與腦間的隔膜,一共有三層,由外向內為硬腦膜、蛛網膜和軟腦膜。硬腦膜,是一厚而堅韌的雙層膜,外層是顱骨內面的骨膜,僅疏松地附于顱蓋,特別是在枕部與顳部附著更疏松,稱為骨膜層。蛛網膜是一層半透明的膜,位于硬腦膜深部,其間有潛在性腔隙為硬腦膜下隙。軟腦膜是緊貼于腦表面的一層透明薄膜,并伸入溝裂。在腦室壁的某些部位,軟腦膜及其血管與室管膜上皮共同形成脈絡組織。脈絡組織中的血管反復分支成叢,突入腦室形成脈絡叢。腦膜細胞圍繞著大腦,參與中樞神經系統的正常發育,能穩定腦軟膜表面的細胞外基質、組織放射狀膠質細胞網絡和小腦皮層分層結構。

方法簡介:

實驗室分離的兔腦膜成纖維采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測:

實驗室分離的兔腦膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

培養基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細胞形態:成纖維細胞樣

傳代特性:可傳3代左右;1-2代以內狀態佳

消化液:0.25%

培養條件:氣相:空氣,95%CO25%

兔腦膜成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。

兔腦膜成纖維細胞

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養法

  組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養法

  ③ 懸浮細胞培養法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

  ④器官培養

  器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用。

兔腦膜成纖維細胞


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原代細胞的培養條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發生脫落,漂浮;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養

  1、原代培養時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;

  4、長期培養時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行


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